Стоянка Мутафова е родена на 2 февруари 1922 година в София. Рожденното й име е Стояна- Мария, но правописна грешка в театрален
афиш кара хората и до днес да я знаят като Стоянка.Завършила е класическа филология в Софийския университет. Един от основателите на Държавния сатиричен театър "Алеко Константинов", където работи от 1956 до 1991 година. Тя участва и в много български филми: "Специалист по всичко", "Кит", "
Езоп","Топло и "Бялата стая". Има три брака - с режисьора Роберт Роснер, журналиста Леонид Грубешлиев и с актьора Нейчо Попов. Има една дъщеря - Мария.
През 2001 година получава наградата "Паисий Хилендарски", а през 2002 - орден "Стара планина", първа степен.
На 01.06.2009 година Мутафова игигра последната си роля на сцената на Сатиричния театър.